《药物生物技术》
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 小孢子游离、诱导与分化、壮苗
1.2.2 用根尖染色体计数法选取不同倍性的对照植株
1.2.3 对照组大麦单株流式细胞仪DNA峰值图
1.2.4 不同诱导时间大麦小孢子愈伤组织流式细胞仪DNA峰值图
1.2.5 小孢子愈伤组织产量及绿苗分化频率
1.2.6 大麦小孢子再生植株群体流式细胞仪DNA峰值图
2 实验结果
2.1 对照组植株的选取与检测
2.2 不同诱导时间小孢子愈伤流式细胞仪检测结果
2.3 大麦小孢子来源愈伤产量及绿苗产量
2.4‘花30’‘甘啤1405’小孢子再生植株群体倍性鉴定
3 讨论
文章摘要:利用流式细胞仪检测大麦(Hordeum vulgare)小孢子离体培养获得的愈伤组织和再生植株细胞核DNA倍性水平及其分布规律,结果表明:大麦‘花30’和‘甘啤1405’小孢子愈伤组织细胞在诱导培养第6天时已发生自发加倍,二倍体细胞数目随着诱导培养时间的延长表现出逐步增加趋势。后期分化时,单倍体、二倍体和四倍体再生植株所占比率分别为7.8%、85.5%、6.7%。两份材料的愈伤产量无明显差异,绿苗分化频率差异显著。结论:大麦小孢子愈伤组织细胞的自发加倍发生在多细胞结构形成(第6天)或更早时期;愈伤分化形成的不同倍性再生植株所占比率相对稳定,不受基因型影响。
文章关键词:大麦,小孢子,自发加倍,流式细胞仪,
项目基金:上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2016)第6-1-2号],西藏自治区科技计划项目(XZ2019NA01-2020-016),现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-05-01A-02),