文章摘要:目的 通过细胞实验及生信分析探究小金丸在乳腺癌骨转移中的作用机制。方法 细胞增殖与活性检测（CCK-8）细胞活力检测方法观察小金丸对MCF-7细胞活力的抑制作用。网络药理学及分子对接两种生信分析手段预测小金丸作用于乳腺癌骨转移的主要成分及靶点。小金丸的活性成分及靶点利用中药系统药理学数据库和分析平台（TCSMP）等传统草药数据库和SwissTargetPrediction数据库筛选，乳腺癌骨转移相关靶点通过GeneCards和DisGeNET数据库筛选，String平台构建蛋白互作网络（PPI），DAVID在线分析基因富集分析（GO）功能和京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析。小金丸主要活性成分-乳腺癌骨转移疾病靶点-通路网络利用Cytoscape3.7.2构建。利用Autodock4软件对接验证分子。蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测基质金属蛋白酶-9（MMP9），缺氧诱导因子1α（HIF1A）和雄激素受体（AR）蛋白表达。结果 小金丸能抑制MCF-7细胞活力，通过氧化还原，蛋白质自磷酸化等过程作用于乳腺癌骨转移。KEGG富集分析得HIF-1、血管内皮生长因子（VEGF）和磷脂酰肌醇3-激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K-Atk)等信号通路发挥作用。分子对接验证结果显示桉树素等有效成分能与AR、MMP9等稳定结合。蛋白质印迹提示，小金丸剂量依赖性抑制MCF-7细胞中MMP-9和HIF1A蛋白的表达。结论 小金丸通过HIF、VEGF等相关信号通路作用于AR、MMP9等主要靶点蛋白，从而改善肿瘤微环境缺氧，抑制血管生成，以及降低细胞侵袭性和细胞活力。

文章关键词:乳腺癌,骨转移,小金丸,网络药理学,分子对接,

项目基金:山东省自然科学基金面上项目（ZR2020MH356）,

论文作者:冯丹丹¹ 刘志勇² 时光喜² 曾奕斐³ 权樱洁³ 刘晓菲¹ 李静蔚² 

作者单位:1. 山东中医药大学第一临床医学院 2. 山东中医药大学附属医院 3. 山东中医药大学中医学院 

论文DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211315

论文分类号: R285

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